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產(chǎn)品名稱:半胱氨酸(Cys)含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC0180

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):半胱氨酸(Cys)含量檢測(cè)試劑盒
蛋白質(zhì)含有三種含硫氨基酸:甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中,Cys是一種含有巰基的含硫氨基酸,從甲硫氨酸轉(zhuǎn)化而來,并且可與胱氨酸互相轉(zhuǎn)化。Cys參與蛋白質(zhì)二硫鍵的形成,經(jīng)常是蛋白質(zhì)活性中心的組成部分,還可以為其它生理生化反應(yīng)提供巰基。此外,Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面,在角蛋白生成中維持重要的巰基酶的活性,并且補(bǔ)充巰基,以維持皮膚的正常代謝,調(diào)節(jié)表皮下層的

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BC0180半胱氨酸(Cys)含量檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

半胱氨酸(Cys)含量檢測(cè)試劑盒

一、半胱氨酸提取 : 1、 液體樣品中半胱氨酸提?。喝?0.1mL 液體樣品,加試劑一 0.9mL,充分混勻,11000 rpm 4℃離心 10min,取上清液,待測(cè)。 2、 組織中半胱氨酸提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,11000 rpm 4℃離心 10 min,取上清液待測(cè)。 3、 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);11000rpm,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。二、測(cè)定操作: 1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長到 600 nm,蒸餾水調(diào)零。 2. 空白管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 100 μL 蒸餾水,500μL 試劑二,500μL 試劑三,混勻后室溫靜置 15 min,于 600nm 處測(cè)定吸光值,記為 A 空白管。 3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 100 μL 標(biāo)準(zhǔn)液,500μL 試劑二,500μL 試劑三,混勻后室溫靜置 15 min,于 600nm 處測(cè)定吸光值,記為 A 標(biāo)準(zhǔn)管。 4. 測(cè)定管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 100 μL 上清液,500μL 試劑二,500μL 試劑三,混勻后室溫靜置 15 min,于 600nm 處測(cè)定吸光值,記為 A 測(cè)定管。

 

半胱氨酸含量計(jì)算: 1. 按液體樣品的體積計(jì)算:半胱氨酸含量(μmol/mL)=[C 標(biāo)準(zhǔn)品×V 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)]×(V 樣總÷V 樣)=1×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管) 2. 按樣本質(zhì)量計(jì)算:半胱氨酸含量(μmol/g)=[C 標(biāo)準(zhǔn)品×V 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)]×(V 樣總÷V 樣)÷W=1×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管) ÷W 3. 按照蛋白濃度計(jì)算:半胱氨酸含量(μmol /mg prot)= [C 標(biāo)準(zhǔn)品×V 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)]÷(V 樣×Cpr)=1×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管) ÷Cpr 4. 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:氨基酸含量(μmol /10 4 cell)=[C 標(biāo)準(zhǔn)品×V 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)] ×(V 樣總 ÷V 樣×細(xì)胞數(shù)量)=1×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管) ÷細(xì)胞數(shù)量 C 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度,1μmol/mL;V 標(biāo)準(zhǔn)品:反應(yīng)體系中加入標(biāo)準(zhǔn)品體積,0.1 mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣品提取液體積,0.1 mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL。W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL。

半胱氨酸(Cys)含量檢測(cè)試劑盒

試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。試劑二:液體×1 瓶,4℃保存。試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存。用前 1 天,向試劑三中加 5 mL 蒸餾水充分溶解,再加磷酸 1.25mL,混勻后蓋緊(防止水分散失)沸水浴 2h;冷卻后加 20 mL 蒸餾水,4℃可保存 2 周。標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1 瓶,1μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。

相關(guān)文獻(xiàn):
《Sulfur dioxide derivatives alleviate cadmium toxicity by enhancing antioxidant defence and reducing Cd2+ uptake and translocation in foxtail millet seedlings》 作者:Yansha Han,Mengyang Wu,Lihong Hao,Huilan Yi 期刊:Ecotoxicology and Environmental Safety 影響因子:4.527 PMID:29625394

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