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產(chǎn)品名稱:谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC0070

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒
測定意義:GOGAT分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同構(gòu)成GS/GOGAT循環(huán),參與氨同化的調(diào)控。
測定原理:GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸,形成兩分子的谷氨酸;同時NADH氧化生成NAD+,340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。

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BC0070谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒

 

產(chǎn)品英文名:  Glutamate Synthase(GOGAT)Assay Kit

產(chǎn)品貨號:BC0070      產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣        產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價格:900
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:  谷氨酸合成酶檢測試劑盒|GOGAT檢測試劑盒|谷氨酸合成酶|試劑盒

簡要介紹:
GOGAT分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同構(gòu)成GS/GOGAT循環(huán),參與氨同化的調(diào)控。
    GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸,形成兩分子的谷氨酸;同時NADH氧化生成NAD+,340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體60ml×1瓶,4保存;
試劑一:液體60ml×1瓶,4保存;
試劑二:粉劑×1支,4保存;
試劑三:粉劑×1支,4保存;
試劑四:粉劑×1支,-20保存。
產(chǎn)品說明:
GOGAT分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同構(gòu)成GS/GOGAT循環(huán),參與氨同化的調(diào)控。
GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸,形成兩分子的谷氨酸;同時NADH氧化生成NAD+,340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:
一、粗酶液提?。?  
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。  
二、測定步驟:

  1. 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長340nm,蒸餾水調(diào)零。
  2. 樣本測定

(1)工作液的配制:臨用前將試劑二、三、四轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解,置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴5min;現(xiàn)配現(xiàn)用。
(2)取1ml工作液和0.1ml樣本于1ml比色皿中,混勻,加樣本的同時開始計時,在340 nm波長下記錄20秒時的初始吸光度A1和5分20秒時的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。
GOGAT活性計算
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。
GOGAT(U/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=354×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
GOGAT(U/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=354×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
GOGAT(U/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.708×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,1.1×10-3 L;ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 ml;V樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬。

相關(guān)文獻(xiàn):

《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
《Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis》 作者:Jie Wang, Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan, Chenliu He,and Qiang Wang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.259 PMID:30666245
《Altered gut microbiota and mucosal immunity in patients with schizophrenia.》 作者:Ruihuan Xua,Bingbing Wu,Jingwen Liang,Fusheng He,Wen Gu,Kang Li,Yi Luo,Jianxia Chen,Yongbo Gao,Ze Wu,Yongqiang Wang,Wenhao Zhou,Mingbang Wang 期刊:Brain Behav. Immun. 影響因子:6.17 PMID:31255682

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒

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