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         總膽固醇（TC）含量測(cè)定試劑盒 微量法

測(cè)定意義：血清TC是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。總膽固醇包括游離膽固醇和膽固醇酯。肝臟是TC合成和貯存的主要器官。膽固醇是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料，也是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分，其血清濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。臨床上將血總膽固醇增高稱(chēng)為高膽固醇血癥。

測(cè)定原理：酯酶催化膽固醇酯作用下水解成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），F(xiàn)C在膽固醇氧化酶作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2，H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下，經(jīng)過(guò)氧化物酶作用下生成紅色醌類(lèi)化合物，其顏色深淺與TC含量成正比。

總膽固醇（TC）含量測(cè)定試劑盒 微量法

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

貨號(hào)：BC1985

規(guī)格：100 管/96 樣

產(chǎn)品內(nèi)容：

    試劑一：異丙醇100mL（自備）。

    TC 工作液：液體20mL×1 瓶，4℃保存。

    TC 標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支，0.5μmol/mL，4℃保存。

產(chǎn)品說(shuō)明： TC 包括游離膽固醇和膽固醇酯。TC 是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。利用酯酶催 化膽固醇酯水解生成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC；進(jìn)一步 利用膽固醇氧化酶催化FC 氧化，生成△4-膽甾烯酮和H2O2；后利用過(guò)氧化物酶催化H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類(lèi)化合物；在500nm 有特征吸收峰，其顏色深淺與TC 含量成正 比。 自備儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96 孔板。

操作步驟:

一、TC 的提?。?/p>

1、 組織中TC 的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約0.1g 組織，加入1mL 試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿，8000g4℃離心10min，取上清，即TC待測(cè)液。

2、 細(xì)胞、細(xì)菌中TC 的提取：先收集400-500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，加1mL試劑一， 超聲波破碎1min（強(qiáng)度20％，超聲2s，停1s），8000g4℃離心10min，取上清，即TC 待測(cè)液。

3、 血清（漿）等樣品：直接測(cè)定。

二、測(cè)定操作：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到500nm，蒸餾水調(diào)零。

2. TC 工作液置于37℃水浴30min。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管：在1mL 玻璃比色皿中依次加入50μLTC 標(biāo)準(zhǔn)品和150μLTC 工作液，混勻，靜置24h 后 于500nm 處比色，記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。

4. 測(cè)定管：在1mL 玻璃比色皿中依次加入50μLTC 待測(cè)液和150μLTC 工作液，混勻，靜置24h后 于500nm 處比色，記為A 測(cè)定管。

注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

相關(guān)文獻(xiàn)：

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